Про тесты. можно ли доверять тестированию на covid-19, как оно работает и что выявляет

СРБ и сердечно-сосудистые заболевания

В последнее время уровень белка CRP также принимается во внимание при диагностике и лечении сердечно-сосудистых заболеваний. Он используется для оценки риска инфаркта миокарда, ишемического инсульта и внезапной остановки сердца

Оказывается, существует взаимосвязь между риском ишемической болезни сердца и уровнем СРБ в крови пациента.

Низкий уровень CRP сопровождает легкое воспаление, которое медицина связывает с атеросклерозом, потому что воспалительный процесс играет ключевую роль в отслоении атеросклеротических бляшек, формировании местных сгустков крови и закупорке кровеносных сосудов. Уровни CRP также связаны с гипертонией, низким уровнем «хорошего» холестерина и метаболическими нарушениями, приводящими к абдоминальному ожирению.

По данным клиники Кливленда – некоммерческого многопрофильного академического медицинского центра (штат Огайо, США) тест на CRP можно использовать для выявления риска развития сердечно-сосудистых заболеваний:

Однако, тест CRP не дает полной картины риска сердечно-сосудистых заболеваний. 

Другие причины повышенного СРБ

Если показание выше 10 мг / л, это может быть сигналом для дальнейших исследований, чтобы ответить на вопрос, что является причиной воспаления.

Такое высокое значение CRP может указывать на: 

• остеомиелит или инфекцию костей;
• туберкулез; 
• воспалительные заболевания кишечника; 
• волчанку; 
• заболевание соединительной ткани;
• какое-то аутоиммунное заболевание; 
• обострение аутоиммунного артрита; 
• пневмонию;
• диабет 2 типа;
• рак – с особым показанием для лимфомы.

Повышение уровня СРБ может быть у женщин:

• принимающих противозачаточные таблетки;
• у беременных – это состояние может указывать на осложнения, поэтому для уверенности следует провести дополнительные тесты.

СРБ и рак

Самая высокая концентрация CRP наблюдается у пациентов со злокачественными новообразованиями, особенно с новообразованиями кроветворной системы. Иногда это трехзначные числа и больше. Если результаты анализа крови на СРБ показывают высокий уровень С-реактивного белка, врачи немедленно начинают искать неопластический процесс, который, помимо повышенного уровня СРБ, еще не вызвал никаких симптомов, кроме измененного уровня СОЭ.

Однако следует помнить, что тест CRP бесполезен при диагностике рака. На его уровень влияет слишком много других факторов. Низкий уровень СРБ не исключает наличия новообразования, а его повышенный уровень должен направлять диагноз в первую очередь на инфекционно-воспалительные заболевания. Более того, белок CRP – очень пластичная молекула: норма может увеличиваться до тысячи раз за 24 или 48 часов – это бывает при острых бактериальных или вирусных инфекциях и после серьезных травм.

Высокий СРБ и диагностика болезни

При острой воспалительной реакции концентрация СРБ многократно увеличивается. Он начинает расти через 6 – 9 часов с момента появления воспаления и достигает максимума через 48 часов. Белок возвращается к исходному уровню в течение 7 – 10 дней после прекращения лечения. 

Тестирование концентрации С-реактивного белка часто до появления симптомов выявляет нарушения в правильном функционировании организма на ранней стадии. 

Результаты выше 50 мг / л являются признаком серьезной инфекции, травмы или хронического заболевания, что потребует дополнительного тестирования для определения причины.

В таких ситуациях быстрая идентификация бактериального патогена особенно важна для определения целевой антибактериальной терапии.

Взятие пробы для ПЦР

Показано, что для выявления нового коронавируса подходят смывы из носоглотки – из ротоглотки вероятность ложноотрицательного анализа немного выше []. Один из важнейших аспектов – время взятия материала. Проведенные исследования показывают, что при взятии материала у больного в первый день проявления симптомов COVID-19 положительный диагноз поставят с вероятностью 94 %, а вот к 10-му дню это будет всего лишь 67 %! [

Существует четкая закономерность: чем позже от возникновения симптомов взят материал, тем меньше шансов обнаружить в нем вирусную РНК.

Есть и хорошие новости: в течение первой недели от возникновения симптомов носоглоточные смывы имеют порядок от 100 000 до 1 000 000 копий вирусной РНК в 1 мл, что делает их легко обнаруживаемыми даже не самыми чувствительными системами. Исследования также показали, что вирусная нагрузка в верхних дыхательных путях может быть одинаковой у людей с проявленной симптоматикой и при бессимптомном течении болезни

Как это работает

HBA-тест основан на принципах естественного отбора сперматозоидов при оплодотворении. Женские гаметы окружены и тесно связаны с так называемым кумулюсом — группой клеток, которые участвуют в нормальных процессах ее созревания и оплодотворения. Одним из важнейших компонентов кумулюса является гиалуронан, который удерживает клетки кумулюса вместе, образует сложную лабиринтную систему и играет решающую роль в селекции сперматозоидов. Последние могут преодолеть барьер на пути к яйцеклетке только предварительно связавшись с гиалуронаном. Для этого на последних этапах сперматогенеза они приобретают специальные рецепторы SPAM1. У недозрелых гамет таких рецепторов нет, поэтому они не могут проникнуть через кумулюс и оплодотворить яйцеклетку.

Для проведения теста небольшой образец эякулята помещают на предметное стекло с гиалуроновой кислотой. Спустя 5-10 минут эмбриолог с помощью микроскопа оценивает результат. Зрелые сперматозоиды связываются с гиалуронатом и теряют прогрессивную подвижность. Благодаря этому можно подсчитать процент связанных с гиалуроновой кислотой, а значит зрелых, половых клеток.

CRP – показания к обследованию

CRP назначается:

• если у пациента есть риск возникновения бактериальной инфекции;
• для пациентов, находящихся на послеоперационном выздоровлении – если значения CRP остаются повышенными через три дня после операции, то можно заподозрить бактериальную инфекцию;
• новорожденным с признаками инфекции;
• пациентам с признаками сепсиса: лихорадкой, ознобом, учащенным дыханием и сердцебиением;
• когда необходимо оценить состояние здоровья, например, при волчанке или артрите;
• чтобы проверить эффективность терапии воспаления – во время нее уровень СРБ должен снижаться;
• для изучения повреждений тела и последствий после перенесенных операций, трансплантации органов и ожогов, для раннего обнаружения возможной инфекции.

Тест CRP может помочь при:

• оценке степени тяжести воспалительного процесса;
• раннем выявлении послеоперационных осложнений;
• обнаружении отторжения трансплантата;
• мониторинге успешности лечения антибиотиками при бактериальных инфекциях;
• наблюдении за пациентами с воспалительными ревматическими заболеваниями.

Таким образом, наиболее распространенное применение теста CRP – определение его уровня при подозрении на воспаление, вызванное бактериальной инфекцией.

Это особенно полезно для отличия вирусных инфекций от бактериальных. Так как при вирусных инфекциях – воспалениях, сопровождающихся повышенным оседанием и увеличением количества лейкоцитов, уровень СРБ остается в более низком диапазоне, чем в случае бактериальной инфекции. И в этом случае его рост намного выше.

Повышение CRP присутствует в следующих случаях:

• при воспалении;
• после операции;
• при наличии злокачественных заболеваний;
• при аллергических  реакциях;
• при хронических воспалительных заболеваниях, таких как ревматоидный артрит или волчанка.

Точность разных ПЦР-тест-систем

После попадания образцов в лабораторию правильность диагноза будет зависеть во многом от тест-системы, которую там используют. На сегодняшний день помимо двух тест-систем, разработанных еще в январе в ГНЦВБ «Вектор», зарегистрировано 8 ПЦР-тест систем []:

• АмплиТест SARS-CoV-2; разработан ФГБУ «Центр стратегического планирования» (ЦСП) Минздрава РФ, Москва;
• АмплиСенс CoVs-Bat-FL (ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва);
• Поливир SARS-CoV-2 (ООО «НПФ «Литех», Москва совместно с ФМБА и НИЦЭМ им. Гамалеи);
• РеалБест РНК SARS-CoV-2 (АО «Вектор-Бест», Новосибирск, Кольцово);
• набор реагентов для выявления РНК коронавирусов SARS-CoV-2 и подобных SARS-CoV (ООО «ДНК-Технология-ТС», Москва);
• набор реагентов для выявления РНК коронавируса SARS-CoV-2 (ФГБУ «48 ЦНИИ» Минобороны России);
• SBT-DX-SARS-CoV-2 (ООО «Система-БиоТех»);
• набор ООО «МедипалТех» из Дубны (производителем указано ООО «Амплитек»).

Из них системы «Вектора» и «Вектор-беста» (последняя через сеть лабораторий «Инвитро» []) используются для исследования проб от государственных медицинских учреждений, поликлиник и больниц. Здесь хочется отметить, что система «Вектора» не содержит в своем составе внутреннего контрольного образца, который должен добавляться во все пробы для контроля правильности выделения РНК и реакции обратной транскрипции []. Отсутствие такого контроля может также потенциально приводить к некоторому количеству ложноотрицательных результатов. Хорошая новость заключается в том, что остальные зарегистрированные тест-системы имеют в своем составе внутренний контроль, а также, по-видимому, обладают более высокой чувствительностью, т.е. дают меньше ложноотрицательных результатов.

Что касается частных клиник, то компании «Хеликс» [] и «Гемотест» [] заявляют, что они используют систему ГНЦВБ «Вектор», в то время как CMD и «Ситилаб » используют более современные системы ЦНИИ Эпидемиологии и ДНК-технологии, соответственно [,

Таким образом, в городах, где представлены сетевые лаборатории, есть возможность сдать анализ частным образом и надеяться на точность проведения процедуры. В первые дни появления симптоматики точность будет выше.

Молекулярные и антигенные диагностические тесты

Диагностические тесты для обнаружения коронавирусной инфекции основаны на выявлении элементов вируса: РНК или белка. В обоих случаях выбирается уникальный элемент SARS-CoV-2, чтобы снизить риск перекрестной реакции со сходными вирусами. Вирион (внеклеточная форма вируса) SARS-CoV-2, как и другие коронавирусы, по своей форме чем-то напоминает мяч с шипами – то самое растиражированное изображение COVID-19. «Шипы» образованы шиповидным белком (S) и отвечают за взаимодействие вируса с клеткой хозяина и проникновение в нее. Шиповидные белки уникальны для каждого вида коронавируса. Оболочка вируса образована липидной мембраной, позаимствованной у клетки хозяина, с включением вирусных белков оболочки Е и М. Именно эти два белка участвуют в образовании вирионов и в поддержании их сферической формы. Внутри вириона находится его генетический материал, молекула РНК, упакованная вместе с белками нуклеокапсида (N). Вместе РНК и белки N образуют структуру, сходную с бусинами на нитке. Это позволяет свернуть длинную цепочку РНК в компактную форму. Генетический код разных видов коронавирусов во многом схож. Например, геномы вирусов SARS и SARS-CoV-2 похожи больше чем на 80%. Но и различий вполне достаточно, они и используются в дизайне диагностических тестов: для теста выбираются уникальные последовательности генома и белки, присущие определенному вирусу.

ПЦР-тест

Этот тест основан на обнаружении генетического материала вируса в биологическом образце методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Метод использует праймеры – короткие цепочки нуклеиновых кислот, специально подобранные для распознавания уникальных мишеней-последовательностей в геноме вируса, и полимеразу – фермент, который создает из праймеров, распознавших участки вируса, более длинные цепочки, копию вирусного гена. Праймеры и полимераза работают вместе только в том случае, если в образце есть генетический материал вируса.

Оценка результата

Расшифровка HBA-теста проводится андрологом. В заключении лаборатории отражается индекс связываемости сперматозоидов с гиалуроновой кислотой в процентах, что по сути является процентом зрелых гамет в образце.

Пороговое значение, при котором говорят о норме HBA-теста, составляет 60%. Все, что выше этого показателя, свидетельствует о нормальном течении сперматогенеза, низкой частоте хромосомных нарушений и фрагментаций ДНК.

Чем показатель ниже, тем возможнее проблемы с зачатием ребенка, низкое качество эмбриона и невынашивание беременности. В зависимости от тяжести нарушений выбирают метод оплодотворения. Чем ниже результат HBA-теста, тем большее предпочтение отдается ИКСИ — инъекции единственного сперматозоида в яйцеклетку. Поскольку в этом случае врач отбирает зрелый, а не случайный сперматозоид, то говорят о физиологической ИКСИ — ПИКСИ.

C-реактивный белок и СОЭ

СОЭ или реакция Бирнацкого – измерение скорости оседания эритроцитов в пробирке с кровью. Она выражается в миллиметрах в час. СОЭ является косвенным показателем воспалительной реакции. Однако, тест СОЭ менее специфичен, чем СРБ.

 Помимо воспаления, на повышение СОЭ также влияют:

1. Ожирение. Жировая ткань – источник интерлейкина 6. Это один из белков, участвующих в образовании воспаления.
2. Почечная недостаточность. В терминальной стадии почечной недостаточности и в случае нефротического синдрома у пациентов значительно повышаются значения СОЭ.
3. Концентрация гемоглобина. Анемия ускоряет падение красных кровяных телец.
4. Форма эритроцитов. Определение СОЭ ненадежно при заболеваниях с аномальными эритроцитами, например, серповидноклеточной анемией.

Если существует диспропорция между концентрацией СРБ и СОЭ, первым делом необходимо принять во внимание возможность ложного измерения из-за вышеупомянутых факторов или при лабораторной ошибке, например, слишком долгое время от сбора до доставки в лабораторию или хранения пробирки в неподходящих условиях. Уровень СРБ более динамично реагирует на усиление воспаления, чем СОЭ

В случае, например, красной волчанки, значение СОЭ может быть повышено при низком уровне СРБ в крови. Это вызвано высоким уровнем интерферона 1 типа, подавляющего выработку печенью СРБ

Уровень СРБ более динамично реагирует на усиление воспаления, чем СОЭ. В случае, например, красной волчанки, значение СОЭ может быть повышено при низком уровне СРБ в крови. Это вызвано высоким уровнем интерферона 1 типа, подавляющего выработку печенью СРБ.

ИФА

ПЦР-тест-системы, как и КТ-диагностика выявляет COVID-19 в острой фазе. Однако весьма актуальна и информация об уже переболевших, на основании которой можно судить об охвате населения заболеванием, а также о числе бессимптомных случаев. Ответы на эти, а также на многие другие вопросы, может дать тест-система на антитела. На сегодняшний день разрабаткой таких тест-систем помимо «Вектора» занимаются такие организации как «Вектор-Бест», ООО «НПО «Диагностические системы», ФНКЦ ФХМ ФМБА России, «МБС-Технологии», а также «Генетико» и Институт молекулярной биологии РАН . К сожалению, тест-системы на антитела требуют намного больших усилий и времени на разработку, чем ПЦР-системы, а их чувствительность и специфичность оставляет желать лучшего. Так, проведенное в США исследование доступных система на антитела показало, что лишь 3 из 14 систем дают надежные результаты (т.е. не более 1% ложноположительных результатов), но при этом их чувствительность не превышает 90% относительно положительных контрольных образцов []. Какова будет чувствительность и специфичность разрабатываемых российских систем — пока неизвестно.

Сделаем краткие практические выводы:

В первые пять дней болезни — ПЦР-диагностика будет достаточно эффективна
Идеальный вариант — тестирование с выездом на дом в тех лабораториях, которые используют системы с контрольными образцами,  о чем мы писали выше. 

Если тест дал отрицательный результат или прошло больше пяти дней от начала болезни, а симптомы сохраняются, то в этом случае поможет с диагностикой КТ; при этом пациентам важно напомнить о соблюдении всех меры предосторожности при нахождении в медицинских организациях. 

Проводить ИФА при текущей низкой точности — едва ли имеет смысл. 
Если симптомов нет, но был контакт, в принципе можно пройти ПЦР-диагностику, но лучше всего на 14 дней уйти на самоизоляцию и наблюдать за самочувствием.. Парадоксальным образом, нам известны истории, когда самих врачей, контактных по COVID-19, тестируют далеко не всегда и на самоизоляцию никто не отправляет
Вопросы финансирования диагностики и конечно кадровой политики (кто вообще останется работать?) не решены

Поэтому, еще раз напоминаем о важности соблюдения всех профилактических мер при контакте с пациентами

Парадоксальным образом, нам известны истории, когда самих врачей, контактных по COVID-19, тестируют далеко не всегда и на самоизоляцию никто не отправляет. Вопросы финансирования диагностики и конечно кадровой политики (кто вообще останется работать?) не решены

Поэтому, еще раз напоминаем о важности соблюдения всех профилактических мер при контакте с пациентами

Отвечаем на вопросы о системе НМиФО в прямых эфирах Вконтакте: https://vk.com/medznanie_ru 

Обсудить последние новости со всеми коллегами России вы можете в чатах:

• WhatsApp: https://chat.whatsapp.com/Izj3ZQ7aI36KK8e2dCjcm4
• Telegram: https://tglink.ru/joinchat/GWBPCkkLipQUnTbXrKqzGA

Регистрируйся на нашем сайте и получай доступ к актуальным образовательным вебинарам

Также читайте статьи: Каким будет сценарий эпидемии COVID-19 в РФ (графики для РФ, Италии, Южной Кореи и США), Правда и мифы о коронавирусе (COVID 19), Вопрос жаропонижающих при коронавирусе: только не НПВП или почему бы и нет?

Повышенный CRP – всегда ли это патология?

У взрослых повышенное значение СРБ превышает 5 мг / л, за исключением курильщиков, людей с ожирением или гипертонией, для которых норма составляет менее 10 мг / л. 

Считается, что у детей старшего возраста повышенное значение СРБ превышает 10 мг / л. Как и в случае со взрослыми, интерпретация результата должна быть предоставлена ​​ педиатру. Он оценит результат в контексте состояния ребенка и данных истории болезни.

Слегка повышенное значения СРБ до 40 мг / л может наблюдаются у пожилых людей и при беременности.

Поэтому при расшифровке результатов и составлении медицинского заключения необходимо учитывать другие лабораторные параметры, такие как общий анализ крови (БКК) с лейкоцитарной формулой.

Серологические тесты — на антитела

Серологические тесты определяют наличие в крови пациента антител — иммуноглобулинов, выработанных в ответ на инфекцию. Насчитывается пять классов иммуноглобулинов. Из них три класса, IgM, IgG и IgА являются основными в иммунной защите организма.

Антитела – это сложные белки с несколькими функциями. Они способны не только распознавать специфические патогены, но и активировать защитные механизмы организма, позволяющие нейтрализовать и уничтожить вирусы и бактерии. Антитела – часть приобретенного иммунитета, поэтому их наличие в крови сигнализирует о встрече с определенным патогеном и подтверждает прошлую инфекцию.

При бактериальной инфекции развитие специфического иммунного ответа достаточно предсказуемо. Первыми на инфекцию реагируют клетки неспецифического иммунитета – нейтрофилы, макрофаги и моноциты. Их задача – найти и обезвредить врага, что они могут сделать и без наводки антител.

КТ

Преимущество КТ-диагностики при наличии клинической картины – это  скорость постановки диагноза и более высокая чувствительность по сравнению с реальностью ПЦР-диагностики: 97,2 % против 83,3 % согласно данным небольшого китайского исследования []. Начиная с 4-5 дня заболевания можно различить так называемый симптом «матового стекла», на стадии прогрессирования такие участки консолидируются,  возникает симптом «булыжной мостовой», «обратного ореола», а в пиковая стадии – «белое легкое» []. Возникает закономерный вопрос: отличается ли картина пневмонии, вызванной именно новым коронавирусом, от заболеваний другой вирусной природы. Ответ – нет. Вирусные пневмонии, будь то аденовирус, грипп или другие респираторные вирусы, выглядят на КТ одинаково.

Однако в условиях пандемии, когда подавляющее большинство вирусных пневмоний имеют коронавирусную природу, использование КТ для диагностики становится более чем оправданным. В последней версии методических рекомендаций Минздрава по профилактике, диагностике и лечению COVID-19 указано, что «наличие клинических проявлений в сочетании с характерными изменениями в легких по данным КТ или обзорной рентгенографии органов грудной клетки вне зависимости от результатов однократного лабораторного исследования на наличие РНК SARS-CoV-2 и эпидемиологического анамнеза» является клинически подтвержденным случаем COVID-19 []. Отметим также, что объем поражения легких при РГ и КТ может не иметь прямой корреляции с клинической тяжестью заболевания. 

Показания к исследованию

• • Подготовка к ВРТ: ЭКО, ИКСИ, внутриматочная инсеминация.
• • Идиопатическое бесплодие.
• • Как метод, который позволяет косвенно судить о фрагментации ДНК в сперматозоидах.
• • Отсутствие эмбрионов хорошего качества в предыдущих попытках ЭКО.
• • Возраст мужчины свыше 35 лет.
• • Выбор оптимального метода ВРТ.

Исследование не проводится при отсутствии или недостаточном количестве подвижных сперматозоидов, в том числе при азооспермии, некрозооспермии, криптозооспермии.

HBA-тест не является рутинным скрининговым методом исследования и можетбыть рекомендован с учетом показателей общей спермограммы. Установлено, что низкий процент зрелых сперматозоидов косвенно связан с такими показателями, как концентрация, подвижность и морфология гамет. Нарушения этих показателей могут стать причиной назначения HBA-теста.